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    土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法

    簡要描述:土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:疊氮鈉葡萄糖肉湯 進(jìn)口、國產(chǎn)Azide Dextrose Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250乙基紫疊氮鈉肉湯 進(jìn)口、國產(chǎn)Ethyl Violet Azide Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250KF鏈球菌瓊脂 進(jìn)口、國產(chǎn)KF Streptococcus Agar用于鏈球菌的選擇性分離及計數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))100LIM進(jìn)口、國產(chǎn)LIM Med

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-25
    • 訪  問  量:809

    詳細(xì)介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法

    100管/96樣

    微量法

    BK-01S6843

    商品介紹:

    測定意義:

    土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。

    測定原理:

    氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現(xiàn)紅色,在波長485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。

    自備實驗儀器及用品:

    篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機、漏斗,濾紙、可見分光光度計、玻璃比色可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸餾水、丙酮(不允許快遞,請用戶自備)。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實驗結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準(zhǔn)備:

    a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

    2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    1mL C溶液,5mg/mL Mitomycin Solution  4℃避光保存

    100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  常溫保存

    5%乳糖發(fā)酵管  20支

    2 ug pCAMBIA3300 pCAMBIA3300 低溫運輸,-20℃保存

    雙水解試驗用(AD) Aaginine dehydrolase Medium 5g

    5g  Inosine,F(xiàn)ree Base   室溫干燥保存

    50T 淋球菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

    25 mg DiBAC4(3) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

    50mL Ammonium Acetate Solution(乙酸銨溶液),1M  Ammonium Acetate Solution,1M  常溫保存

    10mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存

    2 ug pYX212-VHB pYX212-VHB 低溫運輸,-20℃保存

    土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法Dog IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1mlDCBLD2  內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ANKRD45/CT117  瘤/睪抗原117 規(guī)格: 0.2mlVAPA  囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlBeta-lactoglobulin  β-球蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

    Goat anti-Mouse IgG whole serum  羊抗小鼠IgG抗清 規(guī)格: 1mlMSR1/CD204  巨噬細(xì)胞清道夫受體1/2/3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-PRKACB(Thr198)  磷酸化蛋白激C亞性抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

    TNFRSF14/HVEM  瘤壞死因子受體超家族成員14抗體 規(guī)格: 0.2mlBTG3  高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    KARS2/Lysyl tRNA synthetase  賴tRNA的連接抗體 規(guī)格: 0.2mlLCMT1  亮羧基甲基轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    EphA4  酪蛋白激A4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Cdc25B (Ser149)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-B-Raf (Ser602)  磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1mlRELN/Reelin  絡(luò)絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-STAT1 (Ser727)  磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格: 0.1mlFAM155A  FAM155A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    HOXB8  同源盒蛋白B8抗體 規(guī)格: 0.2mlLMO2  T淋巴細(xì)胞易位蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

     


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