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    土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法

    簡要描述:土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法公司正在出售的產品:多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 進口、國產Poly Peptone Yeast Extract Medium用于產氣莢膜梭菌的培養(SN標準)250皰肉基礎 進口、國產Cooked Meat Medium Base加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(GB標準)250皰肉牛肉粒 進口、國產Dried Meat Pa

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-25
    • 訪  問  量:760

    詳細介紹

    特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產品名稱:土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法

    產品規格:100管/96樣

    檢測方法:熒光法

    產品貨號:BK-01S6838

    產品分類:土壤系列
    商品介紹:

    測定意義:

    土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

    測定原理:

    堿性環境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成和,通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。

    自備儀器和用品:

    紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    100次 膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒 DNABACK & PCR Clean-Up Kit 常溫保存

    2 ug pGL3- enhancer pGL3- enhancer 低溫運輸,-20℃保存

    瓊脂B Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 250g

    1瓶 HEL細胞株 HEL 低溫運輸和保存

    0.85%無菌生理鹽水(9ml/支) 0.85% Sterile Saline 9ml*20支/包

    10mg 親和素 Avidin -20℃保存

    125mL RNase-Free TE Buffer(無RNase的TE緩沖液),20X,pH7.4   RNase-Free TE Buffer,20X,pH7.4   常溫保存

    1 管 JM83大腸桿菌 JM83 E.coli Strain -80℃保存

    2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低溫運輸,-20℃保存

    250mL 動物RNAout (TRIzol)  Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存

    2 ug pcDNA3.1-EGFP pcDNA3.1-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

    土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法phospho-RPA32/RPA2(Thr21)  磷酸化復制因子A蛋白2抗體 規格: 0.1ml

    Phospho-p40phox (Thr154)  磷酸化嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 規格: 0.1ml

    APOA1  載脂蛋白A1抗體 規格: 0.1ml

    ADCY1  苷酸環化1抗體 0.2ml

    TLR7  Toll樣受體7抗體 規格: 0.1ml

    TNFRSF19  瘤壞死因子配體超家族成員19抗體 規格: 0.1ml

    ChRM1/Acetylcholine receptor(M1)  毒蕈堿型乙酰受體M1抗體 規格: 0.1ml

    Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG F(ab')2  規格: 0.1ml

    MRCK alpha/CDC42BPA  CDC42結合蛋白激α抗體(MRCKα) 規格: 0.2ml

    IL-5  白細胞介素5抗體 規格: 0.1ml

    phospho-Caveolin-2(Tyr19)  磷酸化細胞質膜微囊蛋白-2抗體 規格: 0.1ml

    MCC  大腸瘤突變蛋白抗體 規格: 0.2ml 

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

    若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

     


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