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    土壤酸性磷酸酶(SACP)測(cè)試盒可見分光光度法

    簡(jiǎn)要描述:土壤酸性磷酸酶(SACP)測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:葡萄糖酪胨瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Dextrose Casein-peptone Agar用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計(jì)數(shù)(APHA方法)250D-環(huán)絲 進(jìn)口、國產(chǎn)加入250ml TSC瓊脂基礎(chǔ)中0.1g/支*2產(chǎn)芽孢肉湯 進(jìn)口、國產(chǎn)Sporulation Broth用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)250B 進(jìn)口、國產(chǎn)Polymyxi

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-25
    • 訪  問  量:546

    詳細(xì)介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測(cè)方法

    貨號(hào)

    土壤酸性磷酸酶(SACP)測(cè)試盒可見分光光度法

    50管/48樣

    可見分光光度法

    BK-01S6837

    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

    測(cè)定原理:

    堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成和,通過測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

    自備儀器和用品:

    紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準(zhǔn)備:

    a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

    b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

    2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

    10ku 超氧化物歧化,人 Superoxide Dismutase -20℃保存

    250mL Sodium Bicarbonate Buffer(鈉緩沖液),0.5M,pH8.0   Sodium Bicarbonate Buffer,0.5M,pH8.0   常溫保存

    1 管 Rosetta-gami(DE3)大腸桿菌 Rosetta-gami(DE3) E.coli Strain -80℃保存

    2 ug pRSET C pRSET C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    250mL 固相RNase清除劑 Surface RNase Erasol 常溫

    2 ug pcDNA6-Flag pcDNA6-Flag 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    麥芽汁 Malt Extract Medium 250g

    5g 中性紅 Neutral Red 室溫保存

    50T 芹菜PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    1 mg Fura-2 AM(鈣離子熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

    250mL BSA Blocking Buffer in PBS  BSA Blocking Buffer in PBS  常溫保存

    土壤酸性磷酸酶(SACP)測(cè)試盒可見分光光度法GERP/TRIM8/RNF27  環(huán)指蛋白27抗體 規(guī)格: 0.2mlClassical swine fever virus, CSFV  豬瘟毒抗體 規(guī)格: 0.2ml

    PID1  磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlAngiotensin III  管緊張素III抗體 規(guī)格: 0.2ml

    CDK5RAP3  周期素依賴性激5激活結(jié)合蛋白C53抗體 規(guī)格: 0.2mlHSP47  熱休克蛋白-47抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Defensin β1  防御素β1抗體 規(guī)格: 0.1mlDC-SIGNR/CD299  CD299抗體 規(guī)格: 0.2ml

    C12ORF63  12號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-INPPL1(Tyr1135)  肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    ZNF268  鋅指脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE2D1  泛素蛋白連接D1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    STAU2  雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PP2A alpha/beta(Tyr119)  磷酸化蛋酸2A(PP2Aα)抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG 規(guī)格: 1mgCYP1A1  細(xì)胞色素P450 1A1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    C6orf150  6號(hào)染色體開放閱讀框150抗體 規(guī)格: 0.2mlCOMP/EPD1/THBS5  軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激p85β抗體 規(guī)格: 0.1mlGSTA3  S轉(zhuǎn)移A3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-CPI17 alpha (Thr38)   磷酸化蛋酸激PKC/CPI-17抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Biotin  兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml

    Dysferlin  Dysferlin蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

     


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