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    NAD激酶(NADK)測試盒微量法

    簡要描述:NAD激酶(NADK)測試盒微量法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產品:營養肉湯(NB)顆粒 英文名稱:Nutrient Broth 產品規格:250g 營養瓊脂(NA)顆粒 英文名稱:Nutrient Agar 產品規格:250g 含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒 英文名稱: 產品規格:300ml*10 平板計數瓊脂(PCA)顆粒 英文名稱:Plate Count Agar 產品規

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-29
    • 訪  問  量:705

    詳細介紹

    實驗結果判斷我有妙招:

    1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

    產品名稱

    規格

    檢測方法

    貨號

    NAD激酶(NADK)測試盒微量法

    100管/48樣

    微量法

    BK-01S6323

    商品介紹:

    測定意義

    測定意義:

    NADKEC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進行磷酸化反應,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)NADP(H)的平衡上具有重要作用。

    測定原理:

    NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

    需自備的儀器和用品:

    可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    100mL 非凍型組織RNA保存液 RNALOCKER 常溫

    200 mL 小鼠內皮細胞分離液1.071 Cell Separation Solution -20℃保存

    250mL HEPES Buffer,1M,pH7.6  HEPES Buffer,1M,pH7.6  常溫保存

    2mL dATP溶液,2.5mM dATP Solution -20℃保存

    2 ug pLentilox 3.7 pLentilox 3.7 低溫運輸,-20℃保存

    沙氏葡萄糖瓊脂 Sabouraud’s Glucose Agar 250g

    1瓶 MPC-11細胞株 MPC-11 低溫運輸和保存

    心浸液瓊脂 Heart Infusion Agar 250g

    5g 四氧 Alloxan Momohydrate 4℃保存

    100mL Tricine Buffer,0.5M pH7.4  Tricine Buffer,0.5M pH7.4  常溫保存

    50次 DNA電泳分子量標準(200-1500bp) DNAMETER 4℃保存

    NAD激酶(NADK)測試盒微量法phospho-NDEL1(Ser242)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體 規格: 0.1mlC3a Receptor/C3aR  過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 0.2ml

    Rabbit Anti-human sIgA/HRP  辣根過氧化物標記兔抗人IgA 規格: 0.1mlTIF1 Alpha/TRIM24  轉錄中介因子Tif1α抗體 規格: 0.2ml

    TRAF4/CART 1  瘤壞死因子受體相關蛋白4抗體 規格: 0.1mlCEP55  中心體蛋白55kDa抗體 規格: 0.2ml

    ANKRD26  錨蛋白重復結構域蛋白26抗體 規格: 0.2mlPLC β2/Phospholipase C beta 2  磷酯Cβ2抗體 規格: 0.2ml

    phospho-c-Abl(Tyr283)  磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1mlRabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

    phospho-CBL2(Tyr731)  磷酸化原蛋白CBL2抗體 規格: 0.1mlKIF3A  驅動蛋白家族蛋白3抗體 規格: 0.2ml

    COX4/COX IV-1  氧化IV亞型1抗體 規格: 0.2mlRNF25  環指蛋白25抗體 規格: 0.2ml

    γ-taxilin/LSR5  脂多糖相關反應蛋白5抗體 0.2mlIFRD1  干擾素相關發育調節蛋白1抗體(神經生因子誘導蛋白PC4) 規格: 0.2ml

    Goat Anti-rat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的羊抗大鼠IgG 規格: 0.1mlphospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體 規格: 0.1ml

    SPON2/M spondin/Mindin  細胞外基質底物反應蛋白2抗體 規格: 0.2mlPARL  骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL抗體 規格: 0.2ml

    UFC1  泛素結合UFC1抗體 規格: 0.2mlPDGFRL  小板源性生因子受體β樣蛋白抗體 規格: 0.2ml

    Mesothelioma  間質細胞蛋白抗體 規格: 0.2mlSAMD15/C14orf174  14號染色體開放閱讀框174 規格: 0.2ml

     


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