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    6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法

    簡要描述:6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法輔酶Ⅱ系列公司正在出售的產品:含200ml生理鹽水均質袋 英文名稱:Physiological Saline 產品規格:200ml/袋*10 含225ml生理鹽水均質袋 英文名稱:Physiological Saline 產品規格:10個/包 含225mlEC肉湯均質袋 英文名稱: 產品規格:10個/包 含225ml堿性蛋白胨水均質袋 英文名稱:Alk

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-29
    • 訪  問  量:1242

    詳細介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

    產品名稱

    規格

    檢測方法

    貨號

    6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法

    100管/96樣

    微量法

    BK-01S6361

    商品介紹:

    測定意義:

    磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,與能量的平衡、生長速率和細胞活力等密切相關。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

    測定原理:

    6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPHNADPH430 nm有特征吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm吸光度增加速率,計算6PGDH活性。

    自備儀器和用品:

    低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實驗結果判斷我有妙招:

    1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    50T 丁型肝炎病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

    25g OPD 干粉 OPD,Powder 避光保存

    2 ug RNAi-Ready pSIREN-RetroQ RNAi-Ready pSIREN-RetroQ 低溫運輸,-20℃保存

    1次 一步法96孔板單菌落質粒DNAout(真空法)  

    2 ug pET-49b(+) pET-49b(+) 低溫運輸,-20℃保存

    CN瓊脂平板  9cm*10

    1瓶 AAV-293細胞株 AAV-293 低溫運輸和保存

    氯化鈉蛋白胨緩沖液顆粒 Buffered Sodium Chloride Peptone Solution 250g

    100µg 人基因組DNA,女性 Human Genomic DNA 4℃保存

    500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.5   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.5   常溫保存

    100uL 小麥Zein基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

    6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法IL-33/NFHEV  白介素33抗體 規格: 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/HRP  辣根過氧化物標記的驢抗兔IgG 規格: 0.1ml

    Phospho-CHK2 (Thr68)  磷酸化細胞周期檢測點激2抗體 規格: 0.1mlRabbit anti-horse IgG whole serum  兔抗馬IgG抗清 規格: 1ml

    Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗抗體IgG 規格: 0.1mlPGGT1β  香葉烯基轉移1β抗體 規格: 0.2ml

    Aurora B/STK-1  有絲分裂激B抗體 規格: 0.1mlphospho-PPAR alpha(Ser12)  磷酸化α型-過氧化活化增生受體抗體 規格: 0.1ml

    Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1mlGlycogen synthase 1  葡萄糖合成1抗體 規格: 0.2ml

    SHP-1  造細胞磷酸抗體 規格: 0.1mlMTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor  管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 規格: 0.1ml

    Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗馬IgM 規格: 0.1mlIL-6  白介素6抗體 規格: 0.1ml

    NGFR/p75NTR  神經生因子受體抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗馬IgG 規格: 0.1ml

    LAP3  亮氨基肽3抗體 規格: 0.2mlNDUFA9  NDUFA9蛋白抗體 規格: 0.2ml

    Bone sialoprotein  骨涎蛋白抗體 規格: 0.1mlDGAT1/Diglyceride acyltransferase  二脂酰甘油酰基轉移抗體 規格: 0.2ml

    Na+/K+-ATPase Alpha1  Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATPα1多肽抗體 規格: 0.2mlFBXW12/FBXO35  FBXW12蛋白抗體 規格: 0.2ml

    SLY  2型豬鏈球菌溶素抗體 規格: 1mlC17orf78  17號染色體開放閱讀框78抗體 規格: 0.2ml

     


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