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    二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

    簡(jiǎn)要描述:二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:A-1培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):A-1 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g M-Endo肉湯 英文名稱(chēng):M-Endo Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g CCFA瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱(chēng):CCFA Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Double Lactose Bile Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
    • 更新時(shí)間:2023-12-29
    • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1483

    詳細(xì)介紹

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對(duì)照管只需要做一管。

    3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

    對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

    產(chǎn)品名稱(chēng):二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

    檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6430

    產(chǎn)品分類(lèi):氧化與抗氧化系列
    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。

    測(cè)定原理:

    DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過(guò)氧化氫,外源添加過(guò)量的辣根過(guò)氧化物酶,催化過(guò)氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定該波長(zhǎng)吸光度增加速率,計(jì)算DAO活性。

    自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

    天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測(cè)定。

    100mL Bicine Buffer,0.5M,pH7.4   Bicine Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

    革蘭氏陰性菌增菌液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g

    5g 雙 (2-  ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷 Bis-Tris 室溫干燥保存

    500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5  Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5  常溫保存

    1mL 植物蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存

    2 ug pTT5 pTT5 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    30次 凝固血液DNAout Blood Clot DNAOUT 常溫

    2 ug pEF6/myc-His C pEF6/myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    M17瓊脂 M17 Agar 250g

    250mg 噻唑蘭 Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide(MTT)  4℃避光保存

    96支 10 μL RNase-free白吸頭(盒裝已滅菌長(zhǎng)尖)  常溫

    二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Jun D  活化蛋白激D抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml

    Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlFMDV Polyprotein (VP1 protein)   口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 1ml

    Rabbit Anti-human IgG F(ab')2  兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 1mgSOX10  轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 規(guī)格: 0.2ml

    AIF  調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEA2  黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GATA6  GATA結(jié)合蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1mlR Cadherin  R Cadherin/CDH4 規(guī)格: 0.2ml

    RND3/RHOE  Rho家族GTP3抗體 規(guī)格: 0.1mlCDCA7  細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白 規(guī)格: 0.2ml

    eIF4G  真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.1mlNIK/MAPKKK14  NFkB誘導(dǎo)激抗體 規(guī)格: 0.1ml

    CT-1/CTF1  心肌營(yíng)養(yǎng)素1抗體 規(guī)格: 0.1mlNRH2  死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlInsulin Receptor R  胰島素受體相關(guān)受體抗體 規(guī)格: 0.2ml

    RP1/DCDC4A  視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPCSK9/NARC1  神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌素9) 規(guī)格: 0.1ml

    StAR/StARD1  促黃體激素誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCNOT6  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

    BCAS3  相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlPAFAH1B3/PAFAHG  小板衍化生因子γ抗體 規(guī)格: 0.2ml 

     


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