NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
SLIK1 Others Human 人 SLIK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鳶尾黃素（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Tectorigenin

CL-0087H4(人腦神經膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2原B2(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Procyanidin B2

IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細胞裂解液 (陽性對照) 原人參二醇（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Protopanaxdiol

小鼠直腸平滑肌細胞*培養基 100mL原人參三醇(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Protopanaxatriol

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養基+5%FBS愈創甘油（標準品）質量規格：含量測定Guaifenesin
貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質量規格：>98.0%(GC)

CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 1H-環五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質量規格：>95.0%(GC)

人前列腺平滑肌細胞*培養基 100mL9-氨基喜樹堿9-Aminocamptothecin質量規格：美國進口

A-431細胞，人表皮癌細胞 流感嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹堿(R)-7-Ethyl Camptothecin質量規格：美國進口

CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽)7-乙基-喜樹堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin質量規格：美國進口
人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明膠培養基10克RT

EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 放現菌速 D cCTINOMYCIND 20-6-0

雜交瘤(B類);C3110D2B2化乙酰膽堿 (培養... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物

BT549細胞，管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級白色粉末RTsigma

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4(葉酸
NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E外消旋5-羥去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6質量規格：美國進口

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine質量規格：美國進口

人腎管狀上皮細胞*培養基 100mL外消旋5-羥托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine質量規格：美國進口

B16F1細胞，小鼠色素瘤細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine質量規格：美國進口

CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。