McCoy’s 5A培養(yǎng)基

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP CHO細胞裂解液 (陽性對照) 水(HPLC grade)質(zhì)量規(guī)格：HPLC gradeWater

人血管平滑肌細胞cDNAHDLEC cDNA馬來酸,順丁1二酸質(zhì)量規(guī)格：AR,HPLC>99%Maleic acid

豬腎細胞;PK-15 內(nèi)膜腺癌細胞，HEC-1-B細胞 Fc細胞，615小鼠前胃癌瘤株硫酸銨質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學級Ammonium sulfate

人胚腎細胞;293FT氯化銫質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學級Cesium chloride

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷質(zhì)量規(guī)格：分子生物學級X-Galactosamidide
M14(人色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6-(γ,γ-二1丙基氨基)嘌呤核苷(植物激素級)6-Dimethylallylamino purine riboside質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級

角質(zhì)細胞生長添加物(不含動物成分)KGS-acf6-(>98%，BR)6-Methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-胞嘧啶 5-methylcytosine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY10027-乙基喜樹堿(標準品)7-Ethylcamptothecin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6 腎癌細胞，OS-RC-2細胞 OK細胞，負鼠腎細胞7-乙基喜樹堿7-Ethylcamptothecin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNATTE-20XLIQ.CONC.TTE濃縮液1L#N/A

小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);DG6-VAP33-GFP 小鼠表皮色素細胞*培養(yǎng)基 100mL炳醋倍錄米 BqcloMqthcsonq Dipropionctq 2234-9-8

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 MouseCOMT兒氧位轉(zhuǎn)移酶250克BR，200u/g

LRPAP1 Others Mouse 小鼠 LRPAP1 / RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) RNASEASOLUTION10MG/ML核糖核酸酶A溶液生物技術級1MLCOLD

人腎上皮細胞裂解物HREpiCL(N-乙酰-L-半胱酸)
McCoy’s 5A培養(yǎng)基HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋噻嗎洛爾-d5 馬來酸鹽rac Timolol-d5 Maleate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

體外管腔形成分析試劑盒IVTFA外消旋馬來酸噻嗎洛爾rac Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

STAT1 Others Human 人 STAT1 / p91 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (R)-(+)-馬來酸噻嗎洛爾(R)-(+)-Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H157(S)-(-)-馬來酸噻嗎洛爾(S)-(-)-Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RH-35細胞，肝癌細胞 人胃腺癌細胞,AGS細胞 黃牛皮膚細胞;BTA-S2替硝唑標記d4Tinidazole Labeled d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口

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