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    酰基轉移酶(AAT)測試盒微量法

    簡要描述:酰基轉移酶(AAT)測試盒微量法公司正在出售的產品:雞支原體培養基基礎 英文名稱: 產品規格:250g V-J瓊脂培養基(USP) 英文名稱:Vogeljohnson Agar Medium 產品規格:250g 液體大豆酪蛋白消化物培養基 英文名稱:SoybeanCasein Digest Medium 產品規格:250g 鹽瓊脂培養基 英文名稱:MannitolSalt Agar Medium

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-26
    • 訪  問  量:619

    詳細介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

    產品名稱

    規格

    檢測方法

    貨號

    酰基轉移酶(AAT)測試盒微量法

    100管/96樣

    微量法

    BK-01S6643

    商品介紹:

    測定意義:

    AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。

    測定原理:

    AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNBTNB412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。

    自備儀器和用品:

    研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實驗結果判斷我有妙招:

    1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    100mg 活性藍 19 Remazol Brilliant Blue R-D-Xylan 室溫保存

    50T 水稻內源基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

    1g 甲基綠 Methyl Green 室溫干燥保存

    500mL Gelatin Blocking Buffer in TBS with azide   Gelatin Blocking Buffer in TBS with azide   常溫保存

    5次 ECL法辛雜交檢測試劑盒 ECL DIG Detection Kit 10×封堵液需要-20℃保存,AP標記的抗DIG抗體和ECL底物需要4℃保存

    2 ug pJM17 pJM17 低溫運輸,-20℃保存

    溴甲紫蛋白胨培養液 Bromocresol Purple Peptone Medium 250g

    1瓶 NBLE細胞株 NBLE 低溫運輸和保存

    嗜冷菌計數瓊脂 Psychrophilic bacteria count agar 250g

    1g 酸性 Phosphatase,Acid -20℃保存

    100mL TB Solution-I   TB Solution-I   常溫保存

    酰基轉移酶(AAT)測試盒微量法Donkey Anti-human IgG  驢抗人IgG 規格: 1mg

    phospho-AKT/PKB(Ser473)  磷酸化蛋白激B抗體 規格: 0.1ml

    IL-17RD  白介素17受體D抗體 規格: 0.1ml

    MTCP1  成熟T淋巴細胞增蛋白1抗體 規格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗羊IgG 規格: 0.1ml

    Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白蛋白-13抗體 規格: 0.2ml

    APG5L/ATG5  自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體 規格: 0.1ml

    phospho-Tau protein(Thr212)  磷酸化微管相關蛋白抗體 規格: 0.1ml

    Rabbit Anti-rat IgM  兔抗大鼠IgM 規格: 1mg

    FRG2B  FRG2B蛋白抗體 規格: 0.2ml

    OST-beta  有機溶質轉運蛋白OSTβ抗體 0.2ml

    Collagen II/Chondrocalcin  Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 規格: 0.1ml

     


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