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    中性轉化酶(NI)測試盒微量法

    簡要描述:中性轉化酶(NI)測試盒微量法公司正在出售的產品:吡哆醇Y培養基 英文名稱:Pyridoxine Y medium 產品規格:250g 假單胞cfc選擇性培養基 英文名稱:Pseudomonas CFC Selective Agar 產品規格:250g 可溶性淀粉培養基 英文名稱:Soluble Starch Medium 產品規格:250g AK瓊脂(2號) 英文名稱:AK Agar(No.2)

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-26
    • 訪  問  量:675

    詳細介紹

    實驗結果判斷我有妙招:

    1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

    產品名稱

    規格

    檢測方法

    貨號

    中性轉化酶(NI)測試盒微量法

    100管/48樣

    微量法

    BK-01S6711

    商品介紹:

    測定意義:

    蔗糖轉化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。                          

    NI主要存在于細胞質中,負責分解細胞質中蔗糖為果糖和葡萄糖。

    測定原理:

    NI催化蔗糖分解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性

    自備用品:

    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    50T 流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

    0.1mg 山羊抗小鼠IgG,熒光素488標記 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

    2 ug pBIND pBIND 低溫運輸,-20℃保存

    10mL TE緩沖液,PH8.5  

    2 ug pFastBac1 pFastBac1 低溫運輸,-20℃保存

    沙氏葡萄糖液體培養基(2015藥典) Sabouraud Dextrose Broth 250g

    1瓶 C3H/10T1/2,Clone 8細胞株 C3H/10T1/2,Clone 8 低溫運輸和保存

    大腸菌群顯色培養基 Coliform Chromogenic Medium 1000(ML)

    50U T4 DNA 聚合  T4 DNA Polymerase -20℃保存

    500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   常溫保存

    0.1mL×10 BL21(DE3)化學感受態細胞 BL21 (DE3) Competent Cell -80℃保存

    中性轉化酶(NI)測試盒微量法Rabbit anti-human IgM whole serum  兔抗人IgM抗清 規格: 1ml

    Lingo-1  Nogo受體反應蛋白抗體 規格: 0.1ml

    Adenovirus 5 E1A  毒早期E1A蛋白抗體 規格: 0.2ml

    Rabbit Anti-human sIgA/Cy7  Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 0.1ml

    Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體 規格: 0.2ml

    HIG1/HIGD1A  缺氧誘導基因1蛋白抗體 規格: 0.2ml

    ART4/CD297  二磷酸苷核糖基轉移4抗體 規格: 0.2ml

    VEGF  管內皮生因子抗體 0.1ml

    CQ028  多基因下調蛋白抗體 規格: 0.2ml

    APE/Girdin  肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 規格: 0.1ml

    Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgM 規格: 0.1ml

    beta-Amyloid(31-35)  β淀粉樣肽(31-35)抗體 規格: 0.1ml

     


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