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    海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法

    簡要描述:海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Iron瓊脂 英文名稱:Iron Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g STAA培養(yǎng)基 英文名稱:STAA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 發(fā)光菌培養(yǎng)基 英文名稱:photobacterium Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)組胺菌培養(yǎng)基 英文名稱:Histamine producing bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-26
    • 訪  問  量:1093

    詳細(xì)介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法

    100管/48樣

    微量法

    BK-01S6719

    商品介紹:

    測定意義:

    海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。

    測定原理:

    TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。

    需自備的儀器和用品:

    分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準(zhǔn)備:

    a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

    2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    48 T 唾液酸測試盒(帶SA標(biāo)準(zhǔn)) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

    100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0  MES Buffer,0.5M,pH9.0  常溫保存

    100次 鳥類種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

    2 ug pMAl-c2E pMAl-c2E 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    明膠蛋白胨 Gelatin Peptone 250g

    250mL Carbonate Buffer(鹽緩沖液),0.5M,pH10  Carbonate Buffer,0.5M,pH10  常溫保存

    腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂) Bile Aesculin Azide Agar 250g

    25mg 8- 環(huán)戊基 -1,3- 二丙基 8-Cyclopentyl-1,3-Dipropylxanthine 室溫保存

    50T 蠶白僵菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    20L SDS-PAGE電泳液(干粉) SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存

    2 ug pXT7 pXT7 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法MTCH2  線粒體載體同源蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-Ep300 (Ser1834)  磷酸化轉(zhuǎn)錄接蛋白EP300抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-B-Raf (Ser446)  磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305)  磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1mlRobo  軸突導(dǎo)向受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TM9SF4  跨膜蛋白9家族成員4抗體 規(guī)格: 0.2mlHPV16 L2  人瘤毒16型L2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    C3c/Complement fragment 3c  補(bǔ)體片段C3c抗體 規(guī)格: 0.2mlMYRIP/SLAC2-C  MYRIP蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    CYP8A1/PTGIS  前列環(huán)素合成抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Jak3 (Tyr980/981)  磷酸化蛋白酪激JAK-3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽1-40(C端)抗體 規(guī)格: 0.1mlC19orf46  19號染色體開放閱讀框46抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Mesothelin  間皮素抗體 規(guī)格: 0.1mlNEK7  絲/蘇蛋白激Nek7抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GSK3 alpha  葡萄糖合成激3α抗體 規(guī)格: 0.1mlG protein beta subunit GI  G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-CDK9 (Thr29)  磷酸化周期素依賴性激9抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Bad(Ser134)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlDCAF13  DCAF13蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    PG-C/Pepsinogen 2  胃蛋白原C抗體 規(guī)格: 0.1mlCK19  細(xì)胞角蛋白19抗體 規(guī)格: 0.1ml

     


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