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    胼胝質(zhì)含量測試盒熒光法

    簡要描述:胼胝質(zhì)含量測試盒熒光法公司正在出售的產(chǎn)品:克氏鐵瓊脂進口、國產(chǎn)KIA100克腸桿菌科的初步鑒定脫氧膽酸鈉瓊脂進口、國產(chǎn)DCLA250克大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)中國藍瓊脂進口、國產(chǎn)China Blue Lactose Agar250克弱選擇性,腸道致病菌選擇分離膽鹽硫乳瓊脂進口、國產(chǎn)DHL Agar250克和志賀氏菌的分離培養(yǎng)

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-24
    • 訪  問  量:1319

    詳細介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    胼胝質(zhì)含量測試盒熒光法

    100管/96樣

    熒光法

    BK-01S6961

    商品介紹:

    測定意義:

    胼胝質(zhì)(callose)是圍繞每個篩孔的邊緣積累的碳水化合物,是一種以β-1,3鍵結(jié)合的葡聚糖,在植物的篩管代謝、配子體發(fā)育等生命活動中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用,其合成、分解直接關(guān)系植物正常的生長代謝過程。

    測定原理:

    胼胝質(zhì)與苯胺藍染料反應(yīng),產(chǎn)生熒光物質(zhì),在激發(fā)波長400nm,發(fā)射波長500nm下熒光強度。

    自備儀器和用品:

    研缽、冰、低溫離心機、熒光酶標儀、黑色96孔板、可調(diào)式移液器、乙醇和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實驗結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    GC瓊脂 GC Agar Base 250g

    1瓶 NCI-H2227細胞株 NCI-H2227 低溫運輸和保存

    ModifiedSclohtens'Broth(MSB) Modified Sclohtens' Broth 250g

    25g L- 天 L-Asparagine 室溫保存

    1000mL Tris-Glycine-Native Running Buffer,10X Tris-Glycine-Native Running Buffer,10X 常溫保存

    10g 考馬斯亮藍R-250 Coomassie Blue R-250 常溫保存

    即用型無菌袋裝液體  

    50次 柱式動物DNAout Column Animal DNAOUT 常溫

    2 ug p426 GAL p426 GAL 低溫運輸,-20℃保存

    厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 250g

    1g 亞精胺三鹽酸鹽 Spermidine Trihydrochloride -20℃保存

    胼胝質(zhì)含量測試盒熒光法C21ORF56  21號染色體開放閱讀框56抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943)  磷酸化鈉鉀ATPα1多肽抗體 規(guī)格: 0.2ml

    PDCD4  凋亡相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

    SNAI2/SLUG  鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-CaM I (Ser 101)  磷酸化鈣調(diào)節(jié)素抗體 規(guī)格: 0.1ml

    ODF3/CT135  瘤/睪抗原135抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-PTPN6(Tyr536)  磷酸化蛋白酪磷酸1C抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MRP2  多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    HIAT1  海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    LEPREL2  皮屑樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Metronidazole  抗體 規(guī)格: 0.2ml

    C11ORF46  11號染色體開放閱讀框46抗體 規(guī)格: 0.2ml

     


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