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    丙酮酸羧化酶(PC)測試盒微量法

    簡要描述:丙酮酸羧化酶(PC)測試盒微量法公司正在出售的產品:M-TGE肉湯進口、國產M-TGE Broth250克奶制品中濾膜細菌計數乙酸鹽瓊脂進口、國產Acetate Agar250克細菌醋酸鹽試驗無瓊脂腦心浸液進口、國產BHI250克用于菌的培養七葉苷進口、國產Esculin Medium250克生化實驗,用于細菌七葉苷水解試驗

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-24
    • 訪  問  量:1181

    詳細介紹

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

    若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

    特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產品名稱:丙酮酸羧化酶(PC)測試盒微量法

    產品規格:100管/96樣

    檢測方法:微量法

    產品貨號:BK-01S6978

    產品分類:糖異生系列
    商品介紹:

    測定意義:

    丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylasePCEC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATPCO2和水生成草酰乙酸、ADPPi,是糖異生過程的個限速酶,在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。

    測定原理:

    PC催化丙酮酸、ATPCO2和水生成草酰乙酸、ADPPi,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm下測定NADH氧化速率,即可反映PC活性

    需自備的儀器和用品:

    分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    50T 馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

    5mL 乳腺上皮細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

    250mL Antigen Retrieval Reagent,5X Antigen Retrieval Reagent,5X 常溫保存

    50次 DNA電泳分子量標準(250-15000bp) DNAMETER 4℃保存

    2 ug pGET-4T-2 pGET-4T-2 低溫運輸,-20℃保存

    肉湯I Broth medium 250g

    1瓶 ES-2細胞株 ES-2 低溫運輸和保存

    225ml LB1肉湯均質袋 LB1 Broth 10個/包

    500U Benzonase核酸 Benzonase Nuclease  -20℃保存

    500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4.   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.4.   常溫保存

    5mL 新生溶液,50mg/mL Novobiocin Sodium Solution -20℃避光保存

    丙酮酸羧化酶(PC)測試盒微量法MMP-9  基質金屬蛋白-9抗體 規格: 0.1ml

    PTRH2  Bcl-2轉錄抑制因子1抗體 規格: 0.2ml

    FAM168A/TCRP1  舌化療耐藥相關蛋白1 規格: 0.2ml

    EP4R/Prostaglandin E Receptor EP4  前列素E受體蛋白4抗體 規格: 0.2ml

    Phospho-ELk1 (Ser389)  磷酸化細胞轉錄因子ELK1抗體 規格: 0.1ml

    HCCR2/LETMD1  宮頸原基因2抗體 規格: 0.2ml

    Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 規格: 0.1mlTSPAN6/TALLA-1/CD231  T細胞急性淋巴母細胞白相關抗原抗體 規格: 0.2ml

    Jak3  蛋白酪激JAK-3抗體 規格: 0.1mlPAP2B  磷脂酸磷酸2b抗體 規格: 0.1ml

    MCG10  RNA相關結合蛋白MCG10抗體 規格: 0.2mlRobo2  軸突導向受體蛋白2抗體 規格: 0.1ml

    Alpha 2 antiplasmin   α2纖溶色素上皮衍生因子抗體 規格: 0.2mlccnb1ip1  周期蛋白B1結合蛋白1抗體 規格: 0.2ml

    Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.1mlp70 S6 kinase alpha  磷酸化核糖體p70 S6蛋白激抗體 規格: 0.1ml

    C21ORF62  21號染色體開放閱讀框62抗體 規格: 0.2mlphospho-NFAT5 (Ser1197)  磷酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體 規格: 0.1ml 

     


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