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    當前位置:首頁   >  產品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測試劑盒  >  50次豚鼠皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

    豚鼠皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

    簡要描述:豚鼠皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:大鼠軟骨細胞*培養基100mL

    Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5&#215;106cells/瓶&#215;2

    小鼠成年表皮角質形成層細胞*培養基小鼠支氣管成纖維細胞*培養基

    • 產品型號:50次
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-17
    • 訪  問  量:325

    詳細介紹

    原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
     特異性強
    PCR反應的特異性決定因素為:
    ①引物與模板DNA特異正確的結合;
    ②堿基配對原則;
    ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

    產品名稱

    英文名稱

    貨號

     豚鼠皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

     Guinea Pig Herpes VirusPCR

    BK-P9220

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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

    技術原理:
     DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
           在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
           發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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    黃綠綠僵菌 Metarhizium flavoviride木耳 Auricularia auricula

    HET-1A, 人食管上皮細胞大鼠肺血管平滑肌細胞*培養基

    大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)英文名稱:PC-12(未分化)

    Fraser肉湯增菌FB1配套試劑 規格: 2x5支 用途: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌。

    HS 683(人腦膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2

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    WI38/VA13(SV-40Z轉肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

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    豚鼠皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)重組蛋白  Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2)

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    人前列腺平滑肌細胞*培養基100mL

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    大鼠軟骨細胞*培養基100mL

    Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2

    小鼠成年表皮角質形成層細胞*培養基小鼠支氣管成纖維細胞*培養基

     

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