尖孢鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒植物病原規(guī)格

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

芬布芬 CAS 36330-85-5 *  規(guī)格： 100mg

1,3-萘二酚 CAS 132-86-5 *  規(guī)格： 50mg

芥酸鹽 CAS 7431-77-8 *  規(guī)格： 20mg

α-細(xì)辛腦 CAS  *  規(guī)格： 100mg

對(duì)羥基苯乙 CAS  *  規(guī)格： 20mg

來(lái)米特 CAS 75706-12-6 *  規(guī)格： 100mg

麥迪 CAS 35457-80-8 *  規(guī)格： 200mg

蘆薈大黃素 CAS 1415-73-2 *  規(guī)格： 20mg

奈芬 CAS  *  規(guī)格： 100mg

大黃酚 CAS 481-74-3 *  規(guī)格： 20mg

銀杏內(nèi)酯J; 白果苦內(nèi)酯J CAS 107438-79-9 *  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ CAS 68027-14-5 *  規(guī)格： HPLC≥98%;5mg/支

膽酸 CAS 81-25-4 *  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

甘草素;甘草醇 CAS 578-86-9 *  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

葫蘆巴堿 CAS 535-83-1 *  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

尖孢鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒植物病原規(guī)格2,3-二甲酸    2,3- two piperidine formic acid*：8249-15-3分子量：

2-三氟甲氧氯  196.55  2- three, f*：450-96-4分子量： C7H4ClF3O

1--3-硝  249.01  1- -3-*：645-00-1分子量： C6H4INO2

1-(對(duì))萘  233.31  1- (p-tolyl-amino) naphthalene*：634-43-5分子量： C17H15N

2-甲-5-甲氧并噻唑  179.24  2甲- 5 -甲氧并噻唑*：2941-69-7分子量： C9H9NOS

黃芪甲苷  Astragalus saponins  784.97022分子量：C41H68O14*：83207-58-3，84687-43-4

4-溴-1，2-(亞甲二氧)  201.02  4- -1, 2- (Ya Jiaji two) benzene*：2635-13-4分子量： C7H5BrO2

1,4-二乙  134.22  1,4- two ethyl benzene*：105-05-5分子量： C10H14

4-(Boc-)-1-[(2-羥)(噻吩-2-)甲]  388.529  4- (Boc- -) -1-[(2- hydroxyphenyl) (thiophene -2-) methyl] piperidine*：870703-80-3分子量： C21H28N2O3S

糠醛  Furfural  96.08分子量： C5H4O2*：35796

直接紅81  Direct red 81  675.6分子量： C29H19N5Na2O8S2*：259636