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    當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測(cè)試劑盒  >  50次反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒廠家

    反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒廠家

    簡(jiǎn)要描述:反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒廠家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:足突蛋白(PDCN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Podocin (PDCN)

    OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5&#215;106cells/瓶&#215;2

    293E(人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾))5&#215;106cells/瓶

    • 產(chǎn)品型號(hào):50次
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-16
    • 訪  問  量:284

    詳細(xì)介紹

    原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
     特異性強(qiáng)
    PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
    ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
    ②堿基配對(duì)原則;
    ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

    注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

    產(chǎn)品名稱

    英文名稱

    貨號(hào)

     反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒廠家

     Ehrlichia ruminantiumPCR

    BK-P9097

    ?
    實(shí)驗(yàn)過程:
    一、試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
    4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

    技術(shù)原理:
     DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
           在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
           發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

    鵝去氧膽酸/CDCABR,98%5/25/100克國產(chǎn)/進(jìn)口

    人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna

    新生兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)

    人白血病細(xì)胞英文名稱:U973

    中華鱉脾來源細(xì)胞英文名稱:CSSTSP1

    苜蓿中華瘤菌鏈霉菌 Streptomyces sp.

    伊紅美蘭瓊脂平板/EMB Agar Plate10塊國產(chǎn)/進(jìn)口

    足突蛋白(PDCN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Podocin (PDCN)

    OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

    293E(人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾))5×106cells/瓶×2

    靈芝 Ganoderma lucidium枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

    反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒廠家維生素B12比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒(含AP二抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    體牛病毒性腹瀉病毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定性基因檢測(cè)試劑盒   進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    植物源性食品土豆(potato)基因檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    胚胎干細(xì)胞基質(zhì)膠溶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10毫升

    全組織酸性酶活性染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

    植物細(xì)胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

    真菌/酵母細(xì)胞色素C氧化酶活性測(cè)定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    食物鈣離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    組織白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

    CASPASE-8蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次

    組織凝血酶/活化凝血因子II(THROMBIN/FACTOR IIa)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

     

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