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    豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素

    更新時(shí)間:2021-10-20      點(diǎn)擊次數(shù):816

    豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素:

    參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

    引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

    ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

    ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

    ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

    ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

    ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

    干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體

    水通道蛋白-2抗體

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    ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體

    ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體

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    脂肪甘油三酯脂酶抗體

    磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

    雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體

    磷酸化水通道蛋白2抗體

    粘附相關(guān)激酶抗體

    磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體

    磷酸化蛋白激酶B抗體

    磷酸化水通道蛋白2抗體

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    磷酸化蛋白激酶B抗體

    磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

    磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體

    磷酸化雄激素受體抗體

    磷酸化雄激素受體抗體

    磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體


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