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    太米阿米病毒PCR檢測(cè)試劑盒RNA質(zhì)量檢測(cè)

    更新時(shí)間:2021-05-19      點(diǎn)擊次數(shù):790

    太米阿米病毒PCR檢測(cè)試劑盒RNA質(zhì)量檢測(cè):
    1)紫外吸收法測(cè)定
    先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋?zhuān)?:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
    濃度測(cè)定
    A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。具體計(jì)算如下:
    RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀釋至495的TE中,測(cè)得A260 = 0.21
    RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g
    取5ul用來(lái)測(cè)量以后,剩余樣品RNA為35 l,剩余RNA總量為:
    35 l × 0.84 gl = 29.4 g
    ②純度檢測(cè)
    RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍1.8到2.1。
    2)變性瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定
    ①制膠
    1g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃,10 ml的10× MOPS電泳緩沖液和18 ml的37% 甲醛溶液(12.3 M)。
    10×MOPS電泳緩沖液
    濃度 成分
    0.4M MOPS,pH 7.0
    0.1M 乙酸鈉
    0.01M EDTA
    灌制凝膠板,預(yù)留加樣孔至少可以加入25 l溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內(nèi),加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個(gè)毫米。

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