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    結直腸腺癌細胞;HCT-15HCT15操作步驟

    更新時間:2024-11-27      點擊次數:498

    結直腸腺癌細胞;HCT-15HCT15操作步驟 :

    1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

    2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 

    3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 

    4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 

    5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

    實驗要點及說明:

    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 

    2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 

    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

    4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 

    5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。


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