<ul id="kuigq"></ul>
<ul id="kuigq"><tbody id="kuigq"></tbody></ul>
<noscript id="kuigq"><table id="kuigq"></table></noscript>
  • <strike id="kuigq"></strike>
    咨詢熱線

    13564080845

    當前位置:首頁  >  技術文章  >  植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒?操作步驟

    植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒?操作步驟

    更新時間:2022-05-17      點擊次數:901
     

    植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒操作步驟:
    1. 樣品的準備:產品僅用于科研
    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml肝su鈉) 灌流血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
    2. 試劑盒的準備工作:
    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
    3. 樣品測定:
    a. 參考下表使用96孔板加入各個組分,注意設置樣品孔和各種空白對照孔。
    注意:加入反應啟動工作液后反應即會開始,可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動工作液的時間先后差異而導致的誤差。
    b. 37℃孵育30分鐘。
    說明:孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異,但為檢測結果的一致性,推薦孵育30分鐘。
    c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片,可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進行雙波長測定。
    4. 樣品中總SOD活力的計算:
    a. 百分率的計算:
    參考如下計算公式計算百分率:
    百分率=[(A空白對照1-A空白對照2)-(A樣品-A空白對照3)] / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
    如果沒有設置空白對照3,則可以把計算公式簡化為:
    百分率=(A空白對照1-A樣品) / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
    如果計算出來的百分率小于30% 或大于70% ,則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的百分率在30-70%范圍內。如果測定出來的百分率偏高,則需適當稀釋樣品;如果測定出來的百分率偏低,則需重新準備濃度較高的待測樣品。
    b. SOD酶活力單位的定義:在上述化酶藕聯反應體系中百分率為50% 時,反應體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意:SOD的活力單位的定義方式有很多種,不同的活力單位需根據其定義的不同進行適當換算。

     


    聯系我們

    上海帛科生物技術有限公司 公司地址:上海嘉定區嘉羅公路1661 號24棟   技術支持:環保在線
    • 聯系人:黃先生
    • QQ:2843593679
    • 電話:13564080845
    • 郵箱:2843593679@qq.com

    掃一掃 更多精彩

    微信二維碼

    網站二維碼

    久久午夜无码鲁丝片午夜精品| 69久久精品无码一区二区| 精品国产一区二区三区免费看| 精品午夜久久福利大片| 蜜臀91精品国产免费观看| 无码人妻精品中文字幕| 精品久久久久久无码人妻蜜桃| 亚洲精品无码中文久久字幕| 亚洲国产精品SSS在线观看AV| 麻豆精品一区二区综合av| 国产精品久久久久久久久| 亚洲欧洲精品视频在线观看| 久久精品无码中文字幕| 日韩精品系列产品| 精品无人区无码乱码毛片国产| 国模吧一区二区三区精品视频| 久久99精品久久久久久hb无码| 国产午夜精品一区二区三区嫩草| 日本久久中文字幕精品| 国产成人亚洲精品| 久久久久久国产精品三级| 国产偷窥熟女高潮精品视频| 国产精品无码素人福利免费| 国产精品久久波多野结衣| 亚洲精品私拍国产福利在线| 国产成人无码精品久久久性色| 亚洲国产成人精品久久久国产成人一区二区三区综 | 四虎国产精品免费视| 国产精品亚洲精品青青青| 98精品全国免费观看视频| 亚洲AV无码久久精品色欲| 高清国产精品人妻一区二区| 国产精品亚洲产品一区二区三区| 国产精品免费电影| 国产精品青青青高清在线观看 | 久久久久久亚洲Av无码精品专口 | 精品无人区无码乱码毛片国产| 精品视频一区二区| 国产a不卡片精品免费观看| 精品国产三上悠亚在线观看| 久久精品国产亚洲AV天海翼|